PCR實(shi)(shi)驗指的是基因擴增(zeng)實(shi)(shi)驗，其特點是能將微量的DNA大幅增(zeng)加，是分子生(sheng)物學研究和實(shi)(shi)驗的常規方法，PCR實驗(yan)室廣泛應用于生物(wu)學(xue)各個領(ling)域，博泰小編帶(dai)大家了解PCR實驗室設(she)計及建設(she)要(yao)求(qiu)有哪些(xie)。

一、PCR實驗室布局(ju)

PCR實驗室原則上(shang)為(wei)(wei)試劑準備(bei)區(qu)(qu)，樣品(pin)(pin)制備(bei)區(qu)(qu)，擴增(zeng)區(qu)(qu)和擴增(zeng)產物分析區(qu)(qu)四個單(dan)獨(du)的(de)工(gong)作區(qu)(qu)域(yu)，并設(she)有專(zhuan)用走廊，各工(gong)作區(qu)(qu)域(yu)應(ying)(ying)設(she)緩沖(chong)間，工(gong)作區(qu)(qu)與緩沖(chong)間宜安(an)裝連(lian)鎖裝置(zhi)。不(bu)(bu)同(tong)功(gong)能(neng)的(de)工(gong)作區(qu)(qu)應(ying)(ying)是分隔獨(du)立的(de)，各工(gong)作區(qu)(qu)有明顯的(de)標志，不(bu)(bu)能(neng)直通，如果緊(jin)密連(lian)接，需(xu)安(an)裝物品(pin)(pin)傳(chuan)遞窗。前(qian)兩(liang)區(qu)(qu)為(wei)(wei)擴增(zeng)前(qian)區(qu)(qu)，后(hou)兩(liang)區(qu)(qu)為(wei)(wei)擴增(zeng)后(hou)區(qu)(qu)。

二、實驗室各區功能及(ji)主(zhu)要設備

1、試劑準備(bei)(bei)區：主要(yao)進行試劑的(de)(de)制(zhi)備(bei)(bei)，分裝和(he)主反應混合液(ye)的(de)(de)制(zhi)備(bei)(bei)。試劑盒(he)用(yong)于樣(yang)品制(zhi)作的(de)(de)材(cai)(cai)料應直接運(yun)送至該(gai)區域。試劑原(yuan)材(cai)(cai)料必須貯存在(zai)本區內(nei)，并在(zai)本區內(nei)制(zhi)備(bei)(bei)成所需的(de)(de)試劑。本區主要(yao)設備(bei)(bei)有天平(ping)，冰箱，離(li)心機，加樣(yang)器，振蕩器等。

2、樣(yang)品(pin)(pin)制備區：主(zhu)(zhu)要(yao)進行樣(yang)品(pin)(pin)的保存，核酸提取，貯存及其加(jia)入至(zhi)擴增反應管和(he)測定DNA的合成。本區主(zhu)(zhu)要(yao)設備有冰箱，生物安(an)全柜，離(li)心機，加(jia)樣(yang)器(qi)，振蕩器(qi)等。本區的壓力梯(ti)度要(yao)求為：相對(dui)于鄰近(jin)區域(yu)為正壓，以(yi)避免從鄰近(jin)區進入本區的氣溶膠污(wu)染，一(yi)般(ban)為+10Pa。

3、擴(kuo)增區(qu)：主要進(jin)行DNA擴(kuo)增。此外(wai)，已制備的DNA模板的加入(ru)和主反應混(hun)合(he)液制備成(cheng)反應混(hun)合(he)液等也可在本(ben)區(qu)內(nei)進(jin)行。本(ben)區(qu)主要設(she)備有：擴(kuo)增儀，冰箱，離(li)心(xin)機，加樣器等。本(ben)區(qu)的壓力梯度要求為：相對于鄰近(jin)區(qu)域為負(fu)壓，以避免氣溶從(cong)本(ben)區(qu)漏出一般為-25Pa。

4、擴(kuo)(kuo)增(zeng)產物分析區(qu)：擴(kuo)(kuo)增(zeng)產物的測(ce)定。本(ben)區(qu)主要設備有酶標儀，洗板機.加樣(yang)器和水浴箱等(deng)。本(ben)區(qu)的壓(ya)力梯度的要求為(wei)：相(xiang)對(dui)于(yu)鄰近區(qu)域(yu)為(wei)負壓(ya)，一般為(wei)-25Pa，以避免擴(kuo)(kuo)增(zeng)產物從本(ben)區(qu)擴(kuo)(kuo)散至(zhi)其(qi)它區(qu)域(yu)。

三、PCR實驗室通(tong)風系(xi)統(tong)及壓力控制

各區域之(zhi)間(jian)應(ying)具備單間(jian)的(de)(de)實(shi)驗(yan)(yan)(yan)工(gong)藝流(liu)，物流(liu)，人流(liu)與(yu)氣流(liu)，形成(cheng)單向(xiang)流(liu)程(cheng)的(de)(de)保護(hu)屏障，避(bi)免實(shi)驗(yan)(yan)(yan)室之(zhi)間(jian)的(de)(de)相互(hu)干(gan)擾，防止氣溶(rong)膠擴(kuo)散(san)對(dui)實(shi)驗(yan)(yan)(yan)過(guo)程(cheng)造(zao)成(cheng)污染。PCR實(shi)驗(yan)(yan)(yan)室并沒有嚴(yan)格(ge)的(de)(de)凈(jing)化(hua)要求(qiu)，但是為避(bi)免各個實(shi)驗(yan)(yan)(yan)區域交叉(cha)污染的(de)(de)可能性，宜(yi)采用全送(song)全排(pai)(pai)的(de)(de)氣流(liu)組織形式，嚴(yan)格(ge)控(kong)制(zhi)送(song)，排(pai)(pai)風的(de)(de)比例以保證個實(shi)驗(yan)(yan)(yan)區的(de)(de)壓(ya)力要求(qiu)。

四、PCR實驗室(shi)裝飾(shi)

實驗(yan)室圍護結(jie)構應牢固(gu)，氣(qi)密性好；所有(you)陰陽角宜采(cai)用(yong)(yong)圓弧過(guo)度；墻(qiang)體內壁(bi)光潔，不積(ji)塵，耐腐蝕(shi)，易(yi)清(qing)洗消(xiao)毒；地面使用(yong)(yong)PVC卷材或(huo)環氧樹脂自(zi)流坪，材料應滿足(zu)無(wu)縫隙(xi)，無(wu)滲(shen)漏，光潔，耐腐蝕(shi)的要求。

五、PCR實驗室注意(yi)事項

1、試劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu)，樣品制(zhi)備(bei)區(qu)設緊急(ji)洗眼器，以保證操作(zuo)人員的安全。

2、幾個(ge)區(qu)域的大小設置情(qing)況，試劑準(zhun)備區(qu)，擴增區(qu)，擴增產物分析區(qu)，空間(jian)可以相(xiang)對(dui)小一些(xie)，樣品制備區(qu)要放(fang)置生物安全柜和低溫冰(bing)箱，空間(jian)應大一些(xie)。